初步研究冬虫夏草二级接种步骤

摘要:冬虫夏草(Cordyceps sinensis sacc)具有很大的经济价值,但目前天然冬虫夏草逐渐减少。现在人们开始了人工培养冬虫夏草。在实验中冬虫夏草二级接种是人工培养冬虫夏草的关键。冬虫夏草二级接种是指由一级种接到接种瓶内。二级种更有利于冬虫夏草子实体的长出。接种前需要配制培养基和灭菌。接种时动作要快且准降低污染率。接种后,放在黑暗室温下培养,观察结果,分析原因,探索更好的方法,从而更利于冬虫夏草子实体的长出。

关键词:冬虫夏草;二级接种;人工培养;接种瓶 
  
    冬虫夏草,冬天是虫,夏天是草,冬虫夏草简称虫草,是冬季真菌寄生于虫草蛾幼虫体内,到了夏季发育而成。冬虫夏草主要分布在青海,西藏,四川,云南,贵州,甘肃海拔4000米左右的高海拔地区,而且含量非常少。冬虫夏草虫体呈金黄色,淡黄色或黄棕色,药用价值高功效好。在国内外被视为珍品,市场需求量大,但因其天然资源量稀少,故价格十分贵。 
    冬虫夏草可以降低血液中的胆固醇和甘油三酯,提高对人体有利的高密度脂蛋白,减轻动脉粥样硬化。 
    除次之外,冬虫夏草还具有直接抗病毒、调节中枢神经系统功能、调节性功能等作用。冬虫夏草能对人体起到如此全面的保健作用,可谓神奇之极,也无愧自古以来“仙草”的美称。在现代社会,服用冬虫夏草已不仅仅是本身身体健康的保证,更重要的是由此带来的极致健康生活品质。 
    1 材料和方法 
    1.1 材料 
    在做二级接种实验时所用的材料:冬虫夏草(Cordyceps sinensis sacc)一级种是由2005年5月从西藏采来的冬虫夏草子实体经无菌分离培养所得。根据多次试验培养基成分结论如下:葡萄糖10g、磷酸氢二钾1g、蛋白胨7g、维生素B2两片、七水硫酸镁0.3g、水1000ml、650ml大米。 
    1.2 方法 
    药品的称量:对于一克以下的用精确的天平称量。在称量过程中,先调节天平所在的平面平衡以及天平平衡,并在左盘中放张滤纸后也要平衡。然后,制定规格,用药匙向左盘中放入所要称取得药品直到平衡。但要注意先把天平放下来,再取盘中的药品。 
    大于等于一克的物品用托盘天平量取即可。首先调节托盘天平平衡,在这一过程中,要注意先把游码调到零点,调平后按左物右码的规则。移动游码直到所需的规格,然后,用药匙向左盘中放药品直到平衡,则左盘中的药品即为所称量的。 
    用量筒量取1000ml的水和650ml的大米。 
    在进行二级种培养基制作过程中,我们运用了一个方案 
    将量好的葡萄糖、磷酸氢二钾、蛋白胨,维生素B2、七水硫酸镁,同时溶解在1000ml水中,用玻璃棒搅拌使溶质完全溶解。设总体积为v,称取0.65v大米约650ml的大米,并用自来水冲洗一遍。把冲洗干净的大米和所配制的溶液放入蒸压锅内,蒸成熟米饭,然后冷直室温,再平均装到十个接种瓶(本试验用的是白色耐高温高压的罐头瓶)内。在装的过程中必须使米饭疏松平齐,然后用细绳和单层塑料袋扎上瓶口。完成后再灭菌。 
    灭菌过程如下:把接种瓶放到灭菌筐中,在灭菌筐放进高压灭菌锅前先检查高压灭菌锅内是否有足够的水,检查标准是看锅底部中央有一个圆孔,当水面高于或等于圆孔面时就可以。再打开电源,然后按设置按钮,通过上下键来调节温度、时间,即125摄氏度、30分钟。最后按液相按钮。此时也可以设定一个保温温度。灭菌后切断电源,通过红外感应打开盖[开盖时身体侧向一旁,因为开盖会有大量热气冒出以免烫伤]小心地把接种瓶摆放在桌面上冷直二十四小时。
 二级接种是指将试管[一级]内的冬虫夏草菌丝接到空间相对较大的接种瓶内,从而有利于冬虫夏草子实体的长出。
    接种步骤: 
    接种前,需将净化工作台提前打开二十分钟,一便工作台内的空气是纯净的,同时也节省时间,提高工作效率。在净化工