初步研究冬虫夏草二级接种步骤

作台上做实验时,需将净化工作台的每一个面都要有用酒精棉彻底擦干净,台上的任何物品也要彻底擦干净。接种时,手也要用酒精棉擦干净,还要带口罩。接种所用的任何仪器如接种铲也要擦干净。接种时,把接种瓶打开试管口不能碰到接种瓶口,而且不能在接种瓶口的上方,用接种铲把试管内的三分之一或四分之一的菌丝快速地放到接种瓶内,并且要使菌丝与大米接触(生长菌丝的面与大米接触]提高菌丝扩展速度。接种时要快速低污染地工作,接种过程中接种铲不要碰到任何面。接种完毕后,在净化工作台上把接种瓶封闭好,然后关掉净化工作台,在写标签[内容:实验名冬虫夏草二级种、作者、日期)。整理净化工作台,打扫地面,刷洗试管,把洗净的试管口向下放在斜面上凉干。把接种瓶放在黑暗室温下培养。 培养两个月时,把接种瓶平均分成三组,编号为a、b、c。在实验台上向a组加细沙子,向b组加大沙子,向c组不加任何东西。 
    a、b、c组的接种瓶放在黑暗室温下培养。 
    2 实验结果 
    这种方法取得实验结果如下: 
    培养三天时,接种瓶内有少量的白色菌丝长出,但有些接种瓶内出现青色被青霉菌污染,还有的变黑、红等,出现这种现象说明此接种瓶已经被污染,需要及时清洗干净,一防止其他接种瓶的污染。(清洗污染接种瓶,带上口罩用小铲把里面的大米全部挖出来放到垃圾袋内,把接种瓶放到水盆里加些洗调剂,用刷子刷,然后再冲洗一遍,倒立在桌面凉干。) 
    几天后有大量白色菌丝长出,同时也有的变红色、黑色、青色等被青霉菌等所污染,同样也要把污染的接种瓶清洗干净,被污染的接种瓶清洗方法如上。 
    十五天,有大量白色菌丝往下延伸,逐渐长满整个接种瓶。此时也有少量接种瓶被污染,也同样的把污染的接种瓶清洗掉。 
    一个月,白色菌丝长满接种瓶,有时也会发现接种瓶内有水珠,则为菌丝呼吸作用的结果。菌丝也延伸到接种瓶的底部。菌落成各种形态,高低不平,出现高峰和低谷。这时有污染的接种瓶则不用清洗掉,因为此时接种瓶内的冬虫夏草菌丝占优势对其他菌的抵抗力增强。 
    两个月,白色菌丝长满接种瓶,发现接种瓶内有水珠。 
    3 讨论 
    由实验结果可知,造成污染的主要原因是由主观造成的。由于自身的操作能力不够或者是在操作中忽视了会造成二级种污染的外来物质。因此在以后要多动手,提高操作能力。同时也要避免外来物质的侵入。通过查找文献,我们了解到了温度、湿度、光照、空气对冬虫夏草子实体长出的影响。过高或过低的温度造成冬虫夏草菌丝的死亡;培养基的营养物质不要太干燥否则不利于子实体的长出;培养冬虫夏草时应避光置于黑暗下培养;在培养后期应该向接种瓶内充氧气,这样有利于冬虫夏草子实体的长出。 
    人工培养冬虫夏草成功后,要扩大培养,供给人们的需求。同时降低了冬虫夏草的价格,使贫困的人也能买冬虫夏草。人工培养出冬虫夏草避免了冬虫夏草的灭绝,有利于资源的多样性。人工培养出冬虫夏草会推动医学的发展,会生产出各种各样的药品和保健品,给社会带来了财富,给人们带来了健康。 
    参考文献 
    [1]白波.人工培养冬虫夏草的研究概况.江西中医药,1984,(2):46- 47.
  [2]包天桐.冬虫夏草与发酵虫草菌的药理作用比较.中西医结合杂志,1988 ,(8):352 - 354. 
    [3]暴增海.我国的虫草资源及其开发利用现状与展望.自然资源,1994,(5):49- 53. 
    [4]车永水,林丽珠.金水宝对冠心病、高血脂症、血流变学的疗效观察.中草药,1996(27):552-553. 
    [5]陈敏,戴如琴,邵爱娟,兰江丽,林淑芳,吴志刚.几种虫草发酵菌丝酯酶同工酶及游离全蛋白的比较.中国中药杂志,1995,(20): 585-586. 
[6]陈庆涛,王琪,刘波.蝙蝠蛾被孢霉[新种]的形态学研究.山西大学学报,1986,(4):70-74. 
    [7]陈庆涛,肖生荣,施至用.中国拟青霉新种及其与虫草的关系.真菌学报.1984 ,(3):24-28.