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电刺激左右侧迷走神经对感染性休克大鼠血压肝功能的保护作用

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抗炎效应在临床的应用。本研究采用盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture，CLP)复制大鼠感染性休克模型，观察电刺激左、右两侧迷走神经时感染性休克大鼠一般情况、血压、肝脏匀浆肿瘤坏死因子α(TNFα)和血清乙酰基转移酶（AST）、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平变化情况，探讨左、右迷走神经分别兴奋对大鼠肝脏炎性反应的影响，进一步阐明胆碱能抗炎通路的作用机制。

　　1  材料与方法

　　1.1  实验动物及分组 

　　40只无特定病原体（SPF）级健康雄性SD大鼠(甘肃中医学院动物实验中心提供),体重200～250 g。动物合格证号：医动字FCXK（甘）20042006。随机分为5组,每组8只。①假CLP组：行假CLP术+双颈部迷走神经干分离术；②CLP组：行CLP术+双颈部迷走神经干分离术；③迷切组：行CLP术+双颈部迷走神经干离断术；④电刺激左侧迷走神经组：行CLP术+双颈部迷走神经干离断术+左侧迷走神经干远端电刺激；⑤电刺激右侧迷走神经组：行CLP术+双颈部迷走神经干离断术+右侧迷走神经干远端电刺激。

　　1.2  CLP模型制作 

　　乌拉坦(1 g/kg)腹腔注射麻醉后，分离颈总动脉及迷走神经；行颈总动脉置管，连接压力传导系统和监护仪连续监测直接动脉压。于前腹正中作长约2～3 cm切口，游离肠系膜和盲肠，以3.0丝线环行结扎盲肠根部，用9号针头于盲端部位穿刺2处，两针孔相距约3 mm，还纳肠管，逐层缝合关腹。术毕皮下注射生理盐水(30 ml/kg)补充体液丢失，碘伏消毒并包扎伤口。假CLP组除不结扎和穿刺盲肠外，其余步骤相同。

　　1.3  迷走神经离断术和电刺激 

　　麻醉后，动物仰卧位固定备皮，在喉头与胸骨之间沿颈腹正中线做长约2.5～4 cm切口，用止血钳将胸骨舌骨肌与胸骨甲状肌分开，即可找到颈动脉鞘(内有颈动脉及颈部神经)。用左手拇指及食指抓住颈皮及颈肌，以中指顶起外翻，右手持止血钳或玻璃分针顺着血管走向钝性分离颈总动脉和迷走神经约3～4 cm，用4.0丝线结扎迷走神经然后剪断，远端与双铂电极连接。CLP术后即刻以5 V、2 ms和1 Hz强度的电能，持续刺激迷走神经远端20 min。

　　1.4  主要试剂及仪器 

　　主要试剂有大鼠TNFα ELISA试剂盒(武汉博士德生物工程研究所提供，批号：EK0526)、一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）检测试剂盒(南京建成生物工程研究所提供，批号：20070918和20070919)主要检测仪器有UV2300上海天美紫外分光光度计、GZ16湘仪台式高

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