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探析兔脂肪源性干细胞在颅骨缺损修复中的应用

[作者:未知[来源：论文网]| 打印 | 关闭 ]

突起伪足（图2）.
    2.3术后大体观察手术植入后大体观察，家兔手术区域无红肿、渗出，无异物排出，给予抗感染治疗，家兔饮食、活动良好.
    2.4定量分析术后14 wk取材，X线摄片显示缺损部位有不同量的骨组织形成. 对照组、单纯支架组和支架+ADSCs组骨缺损部位成骨面积差异无统计学意义（P>0.05）. 支架+成骨诱导ADSCs组的成骨面积大于其余3组，差异具有统计学意义（P<0.01，表2），其余各组间成骨面积无显著性差异.表2兔颅骨缺损修复的定量分析
    2.5组织学分析HE染色可见各组均有不同程度的新骨形成，尤以支架+成骨诱导ADSCs组新骨形成最为显著. 支架+成骨诱导ADSCs组，支架+ADSCs组和单纯支架组均可见支架材料不同程度被吸收，沿支架有新骨形成，支架吸收、新骨形成均以支架+成骨诱导ADSCs组最为显著（图3）.
    3讨论
    ADSCs是一种新的干细胞，能够向骨、软骨、心肌细胞等多个方向分化［1］. ADSCs可经抽脂术获得，安全性较高，不良反应少，患者容易接受， ASCs在体外增殖和诱导时对血清的要求较低［2-5］.
    在抗坏血酸、地塞米松、β磷酸甘油钠的诱导下，ADSCs的ALP的表达增多，诱导2 wk后，茜素红染色阳性，提示有钙结节的形成，而非诱导组茜素红染色为阴性，提示ADSCs向成骨方向的分化. 2003年Lee 等［6］将ADSCs应用于体内成骨研究，将成骨诱导后的ADSCs复合多孔PLA材料埋植于大鼠皮下，8 wk后有骨组织生成. 将成骨诱导的ADSCs与可吸收材料相复合，有望用于修复骨缺损. Alejandro等［3］将成骨诱导后的ADSCs用于修复大鼠腭骨缺损，12 wk后，在缺损部位发现了新生的骨组织. Stefan等［7］将ADSCs与自体松质骨颗粒和纤维蛋白胶相混合，成功用于修复一7岁女孩大面积颅骨缺损，尽管还不能确定这其中ADSCs起了多大的作用，但这一临床病例确实令关注ADSCs的人们大受鼓舞.
    异种骨来源广泛，没有传播疾病的潜在危险性，且因骨组织结构在不同种属动物间存在高度同源性，其骨小梁、小梁间隙、空隙率、骨内管腔系统及骨盐支架的三维结构有利于组织细胞粘附、生长，并为细胞外基质的分泌提供宽大的内部空间及表面积，加之其无机成分主要是羟基磷灰石，与人骨成分相同，因此，异种骨结构植入体内后易被宿主组织细胞接近而发生爬行替代及生物降解，应当是较理想的载体材料［8-10］.
    我们将自制脱钙、去抗原后的异种松质骨用于骨组织工程的支架材料，将其与ADSCs相复合，用于修复骨缺损. 结果表明，脱钙、去抗原后的异种松质骨具有良好的生物相容性，成骨诱导前后的ADSCs均能在其表面良好生长，植入体内后，能够被逐步吸收. 脱钙、去抗原后的异种松质骨可用作骨组织工程的支架.
    我们所用细胞为自体细胞，最大程度减小了因机体免疫力的不同而对试验结果造成的影响. 植入体内12 wk后，取材X线摄片结果显示，成骨诱导后的ADSCs复合异种松质骨支架后能够更好地修复骨缺损，而未诱导的支架+ADSCs、单纯支架、对照组3组间差异无统计学意义. HE染色结果显示支架+成骨诱导ADSCs组，支架+ADSCs组和单纯支架组均可见支架材料不同程度被吸收，沿支架有新骨形成，支架吸收、新骨形成，但均以支架+成骨诱导ADSCs组最为显著. 成骨诱导后的ADSCs促进了骨缺损的修复.
【参考文献】
［1］ Zuk PA, Zhu M, Mizuno H, et al. Multilineage cells from human adipose tissue: Implications for cell 2 based therapies［J］. J Tissue Eng, 2001, 7(2):211-228.

［2］ Jason R, Dudas BA, Kacey G, et al. The osteogenic potential of adiposederived stem cells for the repair of rabbit calvarial defects［J］ . J Ann Plast Surg， 2006，56(5): 543-548.

［3］ Alejandro CJ, James A, Lee MD, et al. Repair of palatal bone defects using osteogenically differentiated fatderived stem cells［J］. J Plastic Reconstruct Sur, 2006,117(3):857-863.

［4］ Liou EJ, Chen PK, Huang CS, et al. Interdental distraction osteogenesis and rapid orthodontic tooth movement: A novel approach to approximate a wide alveolar cleft or bony defect［J］. J Plast Reconstr, 2000, 105(4):1262-1272.

［5］ Eppley BL, Pietrzak WS, Blanton MW. Allograft and alloplastic bone substitutes: A review of science and technology for the craniomaxillofacial surgeon［J］. J Craniofac Surg, 2005,16(6):981-989.

［6］ Lee JA, Parrett BM, Conejero JA, et al. Biological alchemy: Engineering bone and fat from fatderived stem cells［J］. Ann Plast Surg,2003,50(6):610-617.

［7］ Stefan L, Andreas J, Petros C, et al. Autologous stem cells(adipose) and fibrin glue used to treat widespread traumatic calvarial defect:Case report［J］. J Craniofac Surg, 2004, 32:370-373.

［8］ Weissman IL. Translating stem and progenitor cell biology to the clinic: Barriers and opportunities［J］. J Science, 2000, 287(5457):1442-1446.

［9］ Pittenger MF, Mackay AM. Multilineage potential of adult human mesenchymal stem cells［J］. J Science, 1999,284(5411):143-147.

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