在体微透析检测豚鼠胆红素脑病模型脑组织兴奋性氨基酸神经递质

附表　透析液氨基酸含量(±s，μM)
Table　Contents of EAA in the extracelluler liquid of brain
 

组别　 n Asp Glu Gly
对照组 9 0.37±0.294 2.56±0.40 14.02±1.56
模型组 9 0.674±0.453 5.76±5.35 21.35±4.87
t 　 1.427 1.415 3.132
P 　 0.165 0.17 0.008

3　讨论
　　胆红素神经毒性的发生与能量储备耗竭相关；这种胆红素对能量代谢的影响涉及线粒体膜相关电传导与化学传导阻断和ATP生成障碍；在既往研究中我们亦证实胆红素神经毒性细胞ATP含量下降［2］。由于ATP含量下降、细胞内Na+，Ca2+逆浓度运出障碍；胞内Na+，Cl-，Ca2+堆积至渗透负荷增高，水分子进入,细胞水肿。同时由于胞内外离子浓度梯度不能维持，突触前膜持续去极化，Glu等兴奋性氨基酸持续释放，加之胶质细胞逆浓度摄取回收减少，致胞外兴奋性氨基酸神经递质持续上升［1，5］。
　　EAA主要指Glu，Asp；兴奋性氨基酸受体分为NMDA受体和非NMDA受体(包括AMPA/Quisqualate受体和Kainate受体)。NMDA受体活性主要是开放Ca2+通道，其激活至少需三个信号：Gly与NMDA受体结合，Glu/Asp与NMDA受体结合，膜去极化致NMDA受体离子通道内Mg2+让位、Ca2+内流。由于NMDA受体上Gly位点结合是NMDA受体活化前提，因而Glu，Asp，Gly均为EAA重要组成［6］。
　　在本研究中，脑组织电镜观察显示脑神经元及其线粒体肿胀。表明豚鼠腹腔给予胆红素后8 h，可出现胆红素脑病的病理表现，在此状态下提取神经递质，能较好地反映胆红素脑病的病理机制。在本研究中，胆红素脑病模型组神经细胞外Gly较对照组明显升高(P<0.01)，而Asp，Glu尽管较对照组平均值升高，但差异不显著(P>0.05)。在既往对HIE及低血糖动物模型脑内微透析研究中，显示Asp增高尤为明显，Glu次之，而对Gly未作测试与统计［4］。尽管胆红素神经毒性与HIE、低血糖发生机制有根本差别，但均涉及细胞内能量代谢水平降低，因而可能有一些相通的病理生理途径，在NMDA受体活性变化上可能有一致之处。本研究中神经细胞外Gly在胆红素神经毒性新生鼠明显升高，而Gly是NMDA受体活性的前提配体，提示可能通过Gly提高NMDA受体对Asp，Glu敏感性。致NMDA受体过度活化，参与介导胆红素神经毒性。

(本文编辑：黄志强)

［基金项目］　上海科学技术发展基金项目(954119025)
［作者简介］　贲晓明，男，1966年出生，医学博士，主治医师。
［作者单位］　贲晓明（200092　上海第二医科大学附属新华医院儿科研究所）
秦玉明（200092　上海第二医科大学附属新华医院儿科研究所）
何振娟（200092　上海第二医科大学附属新华医院儿科研究所）
吴圣楣（200092　上海第二医科大学附属新华医院儿科研究所）
陈舜年（200025　上海第二医科大学附属瑞金医院）
孙安阳（200032　上海医科大学神经生物学国家重点实验室）

［参　考　文　献］

［1］　Mcodonald JW, Shapiro SM, Silverstein FS, et al. Excitatory amino acid neurotransmitter systems contribute to the pathophysiology of bilirubin encephalopathy. Ann Neurol, 1990, 28: 413～415.
［2］　陈舜年，贲晓明，夏振伟.胆红素脑病动物模型制作与鉴定.新生儿科杂志，1997, 12: 166～169.
［3］　Wennberg RP, Hance AJ. Experimental bilirubin encephalopathy. Pediatr Res, 1986, 20: 789～792.
［4］　Sander M, Butcher SP, Hagberg H. Extracellular overflow of neuroactive amino acids during severe insulin-induced hypoglycemia; in vivo dialysis of the rat hippocampus. J Neurochem. 1986, 47: 178.
［5］　Wennberg RP, Johanson BB, Folbrearova J, et al. Bilirubin indeced changes in brain energy metabolism after osmotic opening of the blood brain barrier. Pedatr Res, 1991, 30: 473～478.
［6］　Amit Y, Cashores W, Schiff D. Studies of bilirubin toxicity at the synaptosome and cellular levels. Seminars in Perinatology, 1992, 17: 186～190.