研究淡竹叶清热作用有效部位及化学成分
草酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号110776-200402)。牡荆苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号11876-200501)。淡竹叶采于江苏省宝华山,经南京中医药大学鉴定教研室吴启南教授鉴定为禾本科(Gramineae)植物淡竹叶Lophatherum gracile Brongn.的干燥茎叶。
2 方法与结果
2.1 不同提取部位抑菌实验
2.1.1 提取部位制备
淡竹叶置于多功能提取罐,60%乙醇回流提取5 h,提取液减压回收溶剂得到淡竹叶总浸膏,总浸膏与硅藻土拌匀,分别加入石油醚、二氯甲烷、甲醇、水逐级超声提取,减压回收溶剂,得石油醚提取部位、二氯甲烷提取部位、甲醇提取部位和水提取部位,作为供试品。
2.1.2 不同提取部位抑菌实验取上述供试品各1 g,加入蒸馏水1 ml,超声溶解。在超净工作台上将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中,待冷却凝固后,用无菌移液管吸取1∶1 000稀释的大肠、金葡、绿脓菌液加到平皿上,用刮铲将菌液涂匀,再用打孔器在培养基上打孔,打孔后每个孔内注入25 μl药液,37℃培养24 h,观察实验结果。结果见表1。表1 淡竹叶不同提取部位抑菌实验结果(略)
从药敏实验中发现,淡竹叶的石油醚、二氯甲烷及水提取部位对该3种细菌抑菌效果为阴性,甲醇提取部位对该3种细菌抑菌效果为阳性,故对甲醇提取部位的抑菌效果做进一步的实验。
2.2 甲醇提取部位抑菌实验
2.2.1 对金葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的抑菌实验将甲醇提取部位的浸膏配成相当于生药浓度为40,20,10,5,2.5,1.25,0.625 g·ml-1。同“2.1”项下方法实验,制作培养基,将菌液涂匀于培养基上,打孔,分别注入20 μl的药液,37℃培养,24 h后观察抑菌结果。结果见表2。表2 不同浓度甲醇提取部位对3菌种抑菌圈直径平均值(略)
从表2中我们可以看出淡竹叶甲醇提取部位对金葡菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有一定的抑菌效果,抑菌效果依次为:绿脓杆菌>金葡菌>大肠杆菌,但都属于低敏的范围。
2.2.2 甲醇提取部位对乙链球菌的抑菌实验将提取部位按照浓度为10,5,2.5,1.25,0.625 g·ml-1制作血平板,加入乙链球菌,放入37℃温箱培养24 h,次日观察实验结果。
结果显示,5 g·ml-1以下均有乙链球菌生长,故淡竹叶甲醇提取部位对乙链的抑菌最小浓度为10 g·L-1。
2 方法与结果
2.1 不同提取部位抑菌实验
2.1.1 提取部位制备
淡竹叶置于多功能提取罐,60%乙醇回流提取5 h,提取液减压回收溶剂得到淡竹叶总浸膏,总浸膏与硅藻土拌匀,分别加入石油醚、二氯甲烷、甲醇、水逐级超声提取,减压回收溶剂,得石油醚提取部位、二氯甲烷提取部位、甲醇提取部位和水提取部位,作为供试品。
2.1.2 不同提取部位抑菌实验取上述供试品各1 g,加入蒸馏水1 ml,超声溶解。在超净工作台上将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中,待冷却凝固后,用无菌移液管吸取1∶1 000稀释的大肠、金葡、绿脓菌液加到平皿上,用刮铲将菌液涂匀,再用打孔器在培养基上打孔,打孔后每个孔内注入25 μl药液,37℃培养24 h,观察实验结果。结果见表1。表1 淡竹叶不同提取部位抑菌实验结果(略)
从药敏实验中发现,淡竹叶的石油醚、二氯甲烷及水提取部位对该3种细菌抑菌效果为阴性,甲醇提取部位对该3种细菌抑菌效果为阳性,故对甲醇提取部位的抑菌效果做进一步的实验。
2.2 甲醇提取部位抑菌实验
2.2.1 对金葡菌、大肠杆菌、绿脓杆菌的抑菌实验将甲醇提取部位的浸膏配成相当于生药浓度为40,20,10,5,2.5,1.25,0.625 g·ml-1。同“2.1”项下方法实验,制作培养基,将菌液涂匀于培养基上,打孔,分别注入20 μl的药液,37℃培养,24 h后观察抑菌结果。结果见表2。表2 不同浓度甲醇提取部位对3菌种抑菌圈直径平均值(略)
从表2中我们可以看出淡竹叶甲醇提取部位对金葡菌、绿脓杆菌和大肠杆菌均有一定的抑菌效果,抑菌效果依次为:绿脓杆菌>金葡菌>大肠杆菌,但都属于低敏的范围。
2.2.2 甲醇提取部位对乙链球菌的抑菌实验将提取部位按照浓度为10,5,2.5,1.25,0.625 g·ml-1制作血平板,加入乙链球菌,放入37℃温箱培养24 h,次日观察实验结果。
结果显示,5 g·ml-1以下均有乙链球菌生长,故淡竹叶甲醇提取部位对乙链的抑菌最小浓度为10 g·L-1。
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