谈夏至草醇提物对休克大鼠自由基损伤的影响
2.3 组织匀浆MDA,SOD测定应用改良硫代巴比妥酸(TBA)微量法测定各脏器组织匀浆MDA含量、黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性(试剂盒购自南京建成生物工程研究所),严格按照试剂盒说明书要求进行操作。组织匀浆蛋白以考马斯亮蓝法进行定量。
2.4 统计学处理所有数据以±s表示,经SPSS 11.0统计软件包进行单因素方差分析,两组间比较用两样本均数t检验,P<0.05为具有显著性差异。
3 结果
3.1 夏至草醇提物对失血性休克大鼠各器官组织匀浆MDA含量的影响模型组肝、肾、心肌、肺组织匀浆MDA含量均显著高于夏至草组和对照组(P<0.01),而夏至草组肝、肺组织匀浆MDA含量与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。见表1。
3.2 夏至草醇提物对失血性休克大鼠各器官组织匀浆SOD活性的影响模型组肝、肾、心肌、肺组织匀浆SOD活性均显著低于对照组(P<0.01);夏至草组除肾匀浆SOD活性低于对照组外(P<0.05),肝、心肌、肺组织匀浆SOD活性与对照组均无统计学差异(P>0.05),且各器官组织匀浆SOD活性高于模型组(P<0.01)。见表2。表1 夏至草醇提物对休克大鼠各器官组织匀浆MDA含量的影响(略)表2 夏至草醇提物对休克大鼠各器官组织匀浆SOD活性的影响(略)
4 讨论
失血性休克是临床急症,微循环障碍以及凝血功能紊乱是引起大鼠肺、肾、肝等多个器官的功能障碍、诱发多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome, MODS)的主要因素之一[1]。因此,从改善微循环障碍以及血液流变性异常来寻找药物和其他有效措施正成为医学研究的重要课题之一。夏至草具有利水消肿、活血化淤作用[6],前期工作研究表明[5],静脉推注不同剂量的夏至草醇提物可改善大鼠的淋巴微循环障碍,增强肠系膜淋巴管收缩频率及幅度,肠淋巴流量、蛋白输出量明显升高,该作用在6 g/kg剂量时最显著,1 g/kg剂量则对淋巴循环未发生影响,在一定范围内呈剂量效应关系。为此,本研究选择了应用6 g/kg的剂量,从自由基损伤角度观察夏至草醇提物对急性微循环障碍大鼠器官损伤的影响,阐明夏至草的药理学作用,并为器官损伤的药物治疗提供实验依据。
自由基损伤在细胞损伤乃至器官功能障碍的发病学中具有重要作用[8]。研究结果表明,大鼠重症失血性休克后,模型组肝、肾、心肌、肺组织匀浆自由基的代谢产物MDA含量均显著升高,具有清除自由基功能的SOD活性降低,结果提示失血性休克在引起大鼠急性微循环障碍的同时,加重了组织细胞的缺氧以及酸性产物潴留,加速了自由基的生成,这是引起自由基产生和释放的重要原因[9],表现在各脏器组织匀浆的自由基产物MDA含量增多,也加速了SOD的消耗;而过多的氧自由基进一步激活补体,补体系统被激活,补体活化产物(C3a,C3b,C5a等)可以刺激巨噬细胞和中性粒细胞释放细胞因子和氧自由基,后者进一步通过膜脂质过氧化作用攻击内皮细胞而加重损伤,形成细胞损伤的恶性循环。输入夏至草醇提物后,各脏器组织匀浆MDA的含量均显著低于模型组,SOD活性升高,结果提示输入夏至草醇提物有效地减轻了失血性休克大鼠各重要器官的自由基损伤,这主要是由于夏至草醇提物具有良好的改善微循环作用,减轻了休克时大鼠的急性微循环障碍,从而缓解了细胞的缺氧状态,抑制了自由基释放,使机体自由基的产生与清除趋于平衡,减轻自由基对组织细胞的损伤作用,最终达到了保护器官功能的作用。
综上所述,夏至草醇提物对失血性休克障碍大鼠具有较好的保护作用,其机制与夏至草醇提物有效改善微循环流态[10,11]、改善细胞缺氧状态,从而减轻组织细胞的自由基损伤有关,这为深入研究夏至草醇提物的药理学作用提供了实验依据。以活血化淤类中药为靶标,可为微循环障碍类疾病的治疗开辟新途径。
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